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如果固定镜和物镜之间的距离沿扫描方向不是恒定的,则将引入散焦,这是远程重新聚焦所必需的。他们采用了无像差远程聚焦的概念,而不是在三维中移动相应的远程反射镜,而是使用高速振镜在固定反射镜上横向扫描了激光点。
if (isMobile()){ document.write(); }。传统的重新聚焦方法是通过机械移动显微镜物镜或样品来实现的,这两种方法都会导致三维方向的扫描速度降低,因为移动物理对象的速度受到惯性的限制。
这样,仍然需要能够达到多kHz速率同时避免会降低其分辨率的像差的3-D扫描技术。我们相信,这为活体成像打开了重要的应用,特别是在神经科学领域。
通过这两种实现,科学家介绍了该技术的应用:然后,我们通过对斑马鱼胚胎的跳动心脏进行成像,证明了我们技术在活体显微镜检查中的潜力。可以将图像的速度与可以改变成像系统的焦点位置的速度紧密地联系在一起,尤其是在三维空间中。为了克服这些限制,UT Southwestern的科学家引入了一种新颖的光学设计,该设计将横向扫描运动转换为三维扫描。重要的是,与以前的技术不同,我们的方法与声库完全兼容光学偏转器,因此理论上能够在三维上以亚微秒为单位进行扫描(例如, 1 MHz)。
为了克服这些限制,UT Southwestern的科学家引入了一种 在光学显微镜中,高速体积成像受缓慢的轴向扫描速度或z扫描机制引入的像差的限制。例如,在神经科学中,高速体积成像对于监视动态生物过程至关重要,包括膜电压活动(时间尺度为1毫秒或更短的动态)或脑血流。
在《光科学与应用》上发表的手稿中由德克萨斯州达拉斯市UT西南医学中心细胞生物学系和Lyda Hill生物信息学系的Reto Fiolka教授领导的一个科学家团队,并且研究人员开发了一种新颖的光学设计来克服这些缺陷。采用了使用阶梯镜和倾斜平面镜的两种实现方式来实现这一概念。
前者允许在有限数量的步骤上任意选择较大的轴向步长,而后者允许任意数量和大小的轴向步骤,并且即使在更有限的扫描范围内,也可以在三维中进行连续扫描。此外,在返回路径上,横向扫描分量得到了完美补偿,从而获得了三维的纯扫描运动。
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